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來源:原創
CSTCHROM多功能泵流架使用說明
產品型號:CST-IPG-12
為了解決樣品過柱時的繁瑣,解放雙手提高效率,我公司推出了一款簡單、好用的免疫親和柱架體系——氣控操作架(又稱泵流操作架、氣流控制架等),用于輔助免疫親和柱的使用。該產品采用堅固、耐化學腐蝕的結構和材料,主要由空氣增壓泵、氣路支架,儲液管及試管架等部分組成,最多可同時處理12個樣品,滿足不同樣品需要,大大提高了處理效率。采用正壓控制模式,不會出現流速過快,流速控制開放式,容易清潔,而且能夠很好的配合免疫親和柱,無需轉接頭。操作架的可拆卸性和便攜性也給了實驗操作更多更靈活的空間。
免疫親和柱利用抗原抗體特異性可逆結合的原理, 將抗體與凝膠共價結合,然后填充柱子。將樣品提取溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。其提純效率很高,適用于各類復雜樣品包括食品、飼料等多種基質。整個純化過程30分鐘左右。
使用時取出親和柱,將上方塞子取出斜剪(或戳孔)再蓋回親和柱上,連接操作架預先放置好的貯液管出口,上樣,去掉親和柱下方堵頭,將出口對入架下方預先放置的試管架或自己準備的試管架相應接液試管中,調節氣室支路節流閥旋鈕,按要求控制流速(必要時可旋緊節流閥旋鈕中部的螺母鎖定流速),洗滌2次,排干液體后,洗脫,有需要的話洗脫液可直接用于霉菌毒素檢測儀器類。
具體操作步驟:
1.準確移取20.0mL樣品提取液,過免疫親和柱,過柱時流速不能快,流速快的話回收效率差,建議采取重力過柱。
2.用20mL水洗滌,洗滌液棄去。
3.為保證洗脫充分,建議以2.0mL色譜甲醇分三步進行洗脫,重力洗脫即可。首先,加入1.0mL甲醇洗脫,當溶劑通過柱子后,孵育30s(孵育即甲醇在柱子中浸泡);然后,再加入0.5mL甲醇進行洗脫,過柱前孵育30s;最后,再加入0.5mL甲醇洗脫,過柱前孵育30s,并使2-3mL空氣通過柱體,收集洗脫液,置2mL量瓶中,并用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。(免疫親和柱操作建議使用氣控操作架,便于控制各個步驟流速,保證較好的回收率)
含儀器操作部分:
1. 將處理后的溶液上樣,調節空氣泵旋鈕以控制總供氣量,調節氣體流速調節閥門(必要時可旋緊節液體流速調節閥鎖定流速),使樣液以1-2滴/秒的速度流出;
2.待樣液完全排干,用去離子水或蒸餾水以2-3d/s的流速洗滌兩次,每次10ml;
3.待液體完全排干,將樣品瓶置于親和柱下方,上樣1ml甲醇以1d/s的速度流出至完全排干。
以上操作步驟是用免疫親和柱--高效液相法檢測中藥中黃曲霉毒素的必經步驟,如使用氣控操作架就能很好的固定親和柱并以可控流速操作,既高效也能使操作誤差減到盡可能小。
附錄:
多功能操作架的安裝使用說明
本套設備包含部件:
名稱 | 數量 | 名稱 | 數量 |
A板 | 1 | B板 | 1 |
C板 | 1 | D板 | 1 |
E板 | 1 | 立柱 | 4 |
固定螺母 | 24+4(備) | 螺母扳手 | 2(備) |
2路氣動泵 | 1 | 3孔金屬氣路閥門 | 2+1(備) |
4*8硅膠管 | 6 | 液體流速調節閥 | 6+2(備) |
30ml儲液管 | 6 | 55ml儲液管 | 6 |
SPE柱轉換頭 | 6+1(備) | 16G長針頭 | 6+2(備) |
16G短針頭 | 6+2(備) | 2*6試管架 | 1 |
扎帶 | 20(備) | 說明書 | 1 |
魯爾公母二通 | 6+2(備) |
備注:帶(備)的是指使用的時候不一定用得上,作為后期的更換件或者需要的時候才使用的,屬于多配的部件。
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